Когато използваме някои консумативи за клетъчни култури, винаги се сблъскваме с проблема с клетъчния пасаж.Днес ще споделя накратко с вас как да използвате високоефективни колби за разклащане за клетъчно преминаване.Когато използваме високоефективни колби за разклащане(https://www.luoron.com/3l5l-high-efficiency-erlenmeyer-flask-product/) за клетъчен пасаж има два метода, от които да избирате, като събиране на клетки чрез центрофугиране и след това пасаж, или директно пасаж.
Метод на центробежен пасаж:
(1) Прехвърлете клетките ввисокоефективна колба за разклащане заедно с хранителната среда към центрофужна епруветка за центрофугиране.
(2) Изхвърлете супернатантата, добавете нова културална среда към центрофужна тръба ипипетаза образуване на клетъчна суспензия.
(3) Пребройте и инокулирайте съответно в колби с нови култури.
Ако се приеме директно преминаване, оставете суспендираните клетки бавно да се утаят на дъното на високоефективната колба за разклащане, изсмучете 1/2~2/3 от супернатантата и след това пипетирайте, за да образувате клетъчна суспензия преди преминаване.
Това, на което трябва да обърнем внимание по време на операцията е, че трипсинът трябва да е предварително затоплен, като температурата е около 37°C.Скоростта на центрофугиране трябва да е подходяща.Ако скоростта е твърде ниска, клетките не могат да бъдат разделени ефективно.Ако скоростта на центрофугиране е твърде висока и времето е твърде дълго, клетките ще бъдат притиснати, причинявайки повреда или дори смърт.Клетките трябва да се наблюдават редовно и ако се установи замърсяване, трябва да се действа навреме.
Време на публикуване: 04 януари 2023 г