• лаборатория-217043_1280

Метод за отстраняване на клетъчни остатъци

Има много клетъчни фрагменти след механичен лизис на клетъчна суспензия.Как да премахнете тези фрагменти?Нека да разгледаме различните подходи:

1. Използвайте метода на разреждане.Когато клетките се разреждат, те също могат да пролиферират, ще стават все повече и повече и съответно клетъчните остатъци ще стават все по-малко.
2. Има и естествено заселване.Клетките се утаяват по-бързо от повечето фрагменти: : Преместете клетъчната суспензия вцентрофужна тръбаи когато повечето клетки потънат, горният разтвор може да се изсмуче и след това да се добави към културалния разтвор, за да се суспендират клетките.Този метод може да се използва многократно, като всеки път можете да наблюдавате дали отговаря на вашите изисквания под микроскоп.
3. Нискооборотна центрофугаможе да премахне отломки, обикновено 700g,5min
4. При центрофугиране, при условие, че броят на клетките е достатъчен, намалете времето за центрофугиране, като например 5 минути, 1000 rpm, вместо 3 минути, 1000 rpm, и отстранете супернатантата, тъй като некрозата и отломките обикновено са в супернатантата!Тази операция трябва да се извърши само веднъж по време на процеса на измиване преди инкубация!

Въпреки че има много начини за премахване на клетъчни остатъци, ще откриете, че центрофугирането е един от най-ефективните методи!

450

И тъй като растителните тъкани и клетки имат клетъчни стени, съставени от целулоза, хемицелулоза и пектин, обикновено е необходимо да се смила кварцов пясък или стъклен прах с подходящ разтвор за екстракция или да се третира с целулаза, за да се постигне целта.Бактериалната клетъчна фрагментация е по-трудна, тъй като целият скелет на бактериалната клетъчна стена всъщност е ковалентна връзка от пептидогликанови кистозни макромолекули, много здрави.Общите методи за разбиване на бактериални клетъчни стени включват ултразвуково раздробяване, смилане на пясък, екструзия под високо налягане или обработка с лизозим.След като тъканта и клетките са разбити, се избира подходящият буфер за извличане на желания протеин.Неразтворимите материали като клетъчни фрагменти се отстраняват чрезцентрофугаили филтриране.

моля, свържете се с Whatsapp & Wechat: +86 180 8048 1709


Време на публикуване: 24 юли 2023 г